CM silpnųjų jonų{0}}mainų membranos chromatografija

SP stipriųjų katijonų mainų membraninės chromatografijos produkto pristatymas 

 

2. Produkto privalumai

Greitas ir efektyvus Didelis surišimo pajėgumas gali būti pasiektas esant iki 40 kartų didesniam srautui nei naudojant tradicinę dervos chromatografiją. Palyginti su įprastine dervos{2} chromatografija, proceso laikas naudojant membraninę chromatografiją gali sutrumpėti 30–40 kartų. Įprastas darbinis srautas yra apie 10 MV/min.

2.2 Didelis surišimo efektyvumas Membraninė chromatografija pasižymi dideliu surišimo pajėgumu ir dideliu srautu esant mažam slėgio kritimui, todėl įkrautas biomolekules galima užfiksuoti vienu praėjimu per modulį.

2.3 Keičiamas ir lankstus Visas membraninių chromatografijos produktų asortimentas gali patenkinti įvairius biomolekulių valymo poreikius, apimančias programas nuo proceso kūrimo iki didelio masto gamybos. Kapsulės dizainas leidžia naudoti vienkartinį-arba gali būti valomas ir pakartotinai naudojamas po tinkamų valymo procedūrų.

2.4 Didesnis produktyvumas Kompaktiška konstrukcija sumažina patalpos pėdsaką. Pašalinus tokias operacijas kaip kolonėlės pakavimas, valymas, valymo patvirtinimas ir kolonėlės saugojimas, apdorojimas gali prasidėti po paprasto subalansavimo naudojant santykinai mažiau buferio. Kadangi nereikia pildyti kolonų, valyti ar sandėliuoti, darbo sąnaudos gali būti sumažintos daugiau nei 50%.

 

 

3 Techniniai parametrai

3.1 Konstrukcinės medžiagos

	Laboratorinė skalė	nedidelio masto	bandomasis mastas	gamybos mastu
membranos tūris	0,2 ml	5 ml	140 ml	5L
Membranos atraminė struktūra	Polipropilenas
membraninis korpusas	Polipropilenas
O žiedas	Silikonas

3.2 Veikimo charakteristikos

	Laboratorinė skalė	nedidelio masto	bandomasis mastas	gamybos mastu
membranos tūris	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L
Rekomenduojamas srautas	1-6 ml/min	25-150ml/min	2-12L/min	25-150L/min
Maksimali darbinė temperatūra	35 laipsnių
Maksimalus darbinis slėgis	3 barai (25 laipsniai)
Maksimalus slėgio skirtumas	3 barai (25 laipsniai)
Laikymo sąlygos	20% etanolaqueousssprendimas

Palyginimas rodo, kad SP membraninės chromatografijos tarnavimo laikas yra panašus į SP Sepharose 6FF.

1 pav. SP membranos chromatografijos surišimo pajėgumo pokyčiai po kelių naudojimo, išbandytų su lizocimu

Be to, įvertinome membranos chromatografijos efektyvumą pašalinant šeimininko ląstelės baltymus ir nukleino rūgštis. Rezultatai yra tokie:

	DNR				HCP
	IgG atkūrimas	Turinys (pg/mg IgG) pagal RT PGR		Pašalinimo faktorius	Turinys (ng/mg IgG) pateikė Elisa		Pašalinimo faktorius
Bėk	%	Prieš Q membraną	Po Q membranos	Žurnalas	Prieš Q membraną	Po Q membranos	Žurnalas
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

1 lentelė. DNR ir šeimininko ląstelės baltymo pašalinimo greitis CHO-išreikštoje IgG medžiagoje, naudojant SP membranos chromatografiją

Eksperimentų serija parodė, kad SP membraninė chromatografija gali veiksmingai pašalinti teršalus išlaikant aukštą tikslinio IgG atkūrimo greitį.

Lyginant Gudiling SP membraninę chromatografiją su importuotais prekių ženklais, surišimo pajėgumo duomenys yra tokie:

Įrišimasctalpumas (mg/mL)	Sartorijus	PALL	Guidling
Lizocimas	25	32	29
Tripsinas	22	27	25

2 lentelė. Įvairių mūsų produktų ir konkuruojančių prekių ženklų baltymų surišimo pajėgumas

Bendras įvertinimas rodo, kad mūsų įrišimo pajėgumai yra panašūs į importuojamų produktų pajėgumus.

2 pav. SP membranos chromatografijos modulio surišimo talpos bandymas, naudojant lizocimą kaip standartą

Palyginti su dinaminiu surišimo pajėgumu ir importuotais produktais, buvo patvirtinta, kad dauguma tikslinių baltymų gali būti užfiksuoti, kai lizocimas išplaunamas 190 mM NaCl.

Esant skirtingoms eliuavimo sąlygoms, mes nustatėme, kad membranos chromatografijos eliuavimo profiliai yra panašūs į agarozės gelio eliuavimo profilius, tačiau baltymų grynumas labai skiriasi esant skirtingoms druskos koncentracijoms. Atliekant mokslinius tyrimus, plėtrą ir gamybą, būtina kiekybiškai nustatyti optimalias eliuavimo sąlygas, kad būtų gauti didelio -grynumo tiksliniai baltymai.

 

4 Tipiniai taikymo atvejai

DNR, virusų ir šeimininko ląstelių baltymų pašalinimas

Plazmidžių, virusų, baltymų fiksavimas ir oligonukleotidų gryninimas

Pigmentų pašalinimas iš mielių fermentacijos sultinio ir didelės talpos{0}}baltymų surinkimas

 

5 Naudojimo procedūra

5.1 Įrangos paruošimas ir surinkimas:

5.1.1: Įdiekite membraninį chromatografijos modulį į ÄKTA chromatografijos sistemą, atlikdami panašias į dervos kolonėles procedūras, užtikrindami, kad srauto kryptis sutaptų su modulio rodyklėmis ir įėjimo kryptimi. Prijunkite modulį naudodami Luer užraktus arba spaustuvus{2}}, kad galėtumėte saugiai integruoti į sistemą.

5.1.2 Nustatykite tiekimo srautą į5–10 MV/minir degazuokite modulį naudodami pusiausvyros buferį, užtikrindami, kad nuotekose nebūtų oro burbuliukų. Kai bus pašalintos dujos, permeato išleidimo angą prijunkite prie chromatografinės sistemos.

5.2: Gydymas prieš-naudojimą:

5.2.1:

Nustatykite tiekimo srautą į5–10 MV/minir atlikti išankstinį{0}}gydymą0,5 M NaOH daugiau nei 5 MV, užtikrinant, kad membrana pasiektų visišką pusiausvyrą.

5.2.2: Esant tokiam pačiam srauto greičiui, atlikite išankstinį apdorojimą su1 M NaCl daugiau nei 5 MVkad membrana pasiektų visišką pusiausvyrą.

5.3 Chromatografijos procesas

5.3.1 Nustatykite tiekimo srautą į 5–10 MV/min ir subalansuokite membraną balansavimo buferiu daugiau nei 5 MV, kol membrana pasieks visišką pusiausvyrą.

5.3.2 Po 0,22 μm išankstinio filtravimo įdėkite mėginį į membraną, kol bus baigtas mėginio įkėlimas arba pasieksite chromatografinio surišimo pajėgumą.

5.3.3 Plaukite su pusiausvyros buferiu daugiau nei 10 MV, kol UV signalas grįš į pradinę liniją.

5.3.4 Taikykite gradientinį eliuavimą arba laipsnišką eliuavimą pagal proceso planą ir, jei reikia, surinkite frakcijas.

5.4 CIP Post-Naudojimo apdorojimas – membranos chromatografijos įrenginys CIP (valymas vietoje)

5.4.1 Nustatykite tiekimo srautą į 5–10 MV/min ir valykite 1 M NaOH ilgiau nei 10 MV, kol UV signalas sumažės žemiau bazinės linijos.

5.4.2 Po 30 minučių cirkuliacijos pereikite prie plovimo vandeniu, kol pH pasieks 7–8, tada tęskite valymą 20 % etanoliu, kol laidumas taps beveik pastovus.

5.5 Membraninės chromatografijos saugykla

Panaudojus ir užbaigus CIP, membraninį modulį galima išimti ir laikyti pamirkius 20 % etanolyje, arba jį galima laikyti linijoje kambario temperatūroje tirpale, kuriame yra 20 % etanolio. 20 % etanolio tirpalą reikia periodiškai tikrinti ir pakeisti.

 

6. Užsakymo informacija

Q stiprus anijonų mainų membranos chromatografijos kapsulės filtras

	Laboratorinė skalė	nedidelio masto	bandomasis mastas	gamybos mastu
Produkto modelis	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Membranos tūris	0,2 ml	5 ml	400 ml	5L

Populiarus Žymos: cm silpnų jonų -mainų membraninė chromatografija, Kinija, tiekėjai, gamintojai, gamykla, didmeninė prekyba, urmu, sandėlyje, nemokamas pavyzdys