Veiksniai, turintys įtakos virusų šalinimo efektui
Veiksniai, turintys įtakos virusų šalinimo efektui
Virusų šalinimo filtravimas gali reikšmingai pašalinti virusus tirpaluose, o jo pašalinimo efektas yra susijęs su viruso šalinimo filtravimo vieta, pašarų skysčio baltymų koncentracija, filtravimo slėgiu, laikymo trukme ir kriokonservavimu ir kt.
1. Kur vyksta virusų šalinimo filtravimas
Viruso pašalinimo filtravimas gali būti atliekamas bet kurioje tolesnio valymo vietoje, tačiau paprastai jis vyksta po žemo pH viruso inaktyvavimo, tarpinių chromatografijos etapų arba paskutinių chromatografijos etapų. Apskritai, tolesnio proceso metu tikrieji filtravimo reikalavimai labai priklauso nuo to, kurioje proceso vietoje yra viruso filtravimo etapas, nes baltymų koncentracija, grynumas ir proceso tūriai gali skirtis.
2. Baltymų koncentracija pašarų skystyje
Baltymų koncentracija mėginyje turės įtakos viruso pašalinimo filtravimo srautui dėl sąveikos tarp pašaro tirpalo ir membraninio maišelio. Didesnė baltymų koncentracija sumažins viruso pašalinimo filtravimo procesą. Tai taip pat susiję su paties baltymo ir pačios membranos savybėmis. Paprastai produkto koncentracija sumažinama nuolat skiedžiant produktą, kad padidėtų viruso šalinimo filtro membranos talpa ir srautas.
3. Filtravimo slėgis
Viruso pašalinimo filtravimo procesas paprastai turi užtikrinti nuolatinį filtravimą. Nes dėl slėgio pertraukimo gali prasiskverbti virusas. Principas yra toks: per filtrą tekančio pašaro skysčio konvekcinis poveikis priverčia viruso daleles įstrigti membranos paviršiuje arba įstrigti mažesnio dydžio porose dėl molekulinio dydžio išskyrimo. Kai slėgis krinta, sumažėja srautas ir konvekcijos efektas. Virusas pabėgs ir išsiskirs iš mažų porų ir pasklis į dideles poras su didele tikimybe prasiskverbti.
4. Laikymo laikas ir šaldymas
Kai kurie baltymai susidaro agregatus saugojimo proceso metu, ypač šaldant. Šie agregatai gali turėti įtakos virusų pašalinimo filtravimui. Todėl reikia įvertinti, ar gamybos procese yra ilgas saugojimo laikotarpis, ar reikalingas kriokonservavimas.
