„Guidling“ technologija leidžia išmokti paprastą ir veiksmingą gėlinimo ir koncentravimo metodą

Atskyrus ir išgryninus baltymus dažnai reikia nusūdyti, o šios druskos daugiausia gaunamos iš įvairių gyvų organizmų jonų (pvz., natrio jonų, kalio jonų, chlorido jonų ir kt.), taip pat buferinių druskų ekstraktuose, druskų eliuentai ir tam tikrų eksperimentams naudojamų denatūrantų druskos komponentai. Didelė druskos koncentracija gali paveikti baltymų aktyvumą ir stabilumą, taip pat jų sąveiką su kitomis molekulėmis, generuoti trikdančius signalus arba sumažinti matavimų tikslumą taikant tolesnius analizės metodus, tokius kaip elektroforezė, masės spektrometrija ir kristalografiniai tyrimai. Todėl išgrynintus baltymus po atskyrimo labai būtina nusūdyti, o pagrindiniai dažnai naudojami druskų šalinimo būdai yra membraninė (dializė ir ultrafiltracija) ir gelio filtravimo chromatografija. Be to, kai kuriais atvejais gėlinimas gali būti pasiektas praskiedus.

 

Dializės gėlinimas, dėl ilgo ciklo ir didelio pakaitinio skysčio poreikio, jo taikymas buvo labai apribotas, mažiau naudojamas pramonėje, tačiau daugiausia naudojamas laboratorijoje, laboratorija taip pat palaipsniui pakeičiama ultrafiltravimo vamzdeliais. /ultrafiltracijos puodelis.

 

Pagrindinė baltymų nudruskinimo ir koncentravimo procese naudojama membranos atskyrimo technologija yra ultrafiltravimas. Ultrafiltravimas yra membranos atskyrimo technologija, pasižyminti dideliu efektyvumu, mažu energijos suvartojimu, be fazių pasikeitimo, nereikia pridėti jokių cheminių reagentų, lengvas veikimas, švelnios sąlygos, gebėjimas geriau išlaikyti biologinių makromolekulių aktyvumą, didelis regeneravimo greitis ir kiti privalumai. , o jo naudojimas baltymų atskyrimui ir gryninimui turi unikalių pranašumų.

 

Ultrafiltravimas yra membraninio filtravimo metodas, kurio metu kaip atskyrimo terpė naudojama akyta membrana ir remiamasi slėgio skirtumu tarp dviejų membranos pusių, kaip varomąją jėgą atskirti skirtingos molekulinės masės medžiagas tirpale, taip atliekant gėlinimo, koncentravimo vaidmenį. ir valymas. Tai pastaraisiais metais sukurtas naujas metodas, labiausiai tinkantis biologinių makromolekulių, ypač baltymų ir fermentų, koncentravimui ar gėlinimui. Ultrafiltracijos taikymo pagrindas yra membranos pasirinkimas, skirtingi membranos tipai ir specifikacijos, skiriasi vandens srauto greitis, molekulinės masės riba ir kiti parametrai, ji turi būti parinkta pagal atitinkamus darbo poreikius. Be to, ultrafiltravimo įtaiso forma, tirpių medžiagų sudėtis ir savybės, tirpalo koncentracija ir kt. turi tam tikrą įtaką ultrafiltravimo poveikiui.

 

Ultrafiltravimo technologijos taikymas baltymams nusūdyti ir koncentruoti baltymų gryninimo procese pasižymi tinkamumu dideliems skysčių kiekiams, nuo kelių šimtų iki kelių tūkstančių litrų, apdoroti, o eksploatavimo paprastumas, laiko taupymas. ir didelis baltymų atkūrimo greitis. Ultrafiltravimo metodas brandinamas iš ultrafiltravimo vamzdžių, skirtų laboratoriniam mikrotūrio apdorojimui, ultrafiltravimo puodelių, skirtų mažo tūrio apdorojimui, ir ultrafiltravimo sistemų pramoniniam naudojimui.

 

Ultrafiltravimas yra suskirstytas į tiesioginio slėgio ultrafiltravimą ir tangentinį srauto filtravimą, o šiuo metu tangentinis srauto filtravimas daugiausia naudojamas pramonėje, kuri plačiai naudojama gėlinimui ir buferio keitimui.

 

Toliau pateikiamas Guidling Technology ultrafiltravimo membraninių kasečių panaudojimo baltymų gėlinimui ir koncentravimui pavyzdys.

 

Naudojome {{0}},11 ㎡ 10 kd porų dydžio membranos kasetę (G01100010K) 500 ml PEG modifikuoto augimo hormono tirpalo, kurio koncentracija yra 0,2 mg/ml, nudruskinimui ir koncentravimui. Viso ultrafiltravimo proceso metu buvo tiriamas gėlinimo greitis, baltymų atkūrimo greitis, membranos srauto gedimo būklė ir vandens srauto atsigavimo greitis.

 

Prieš naudojimą ir po naudojimo mes išbandėme membranos kasetės vandens srautą atskirai, o membranos kasečių regeneravimo greitis pasiekė 98%, laikantis prielaidos išlaikyti tą patį tiekimo greitį, tiekimo slėgį ir grįžtamojo srauto slėgį.

 

Visas procesas iš viso apdorojo 2 l medžiagos ir užtruko 40min., 0-5min buvo koncentravimo procesas, 5-35min buvo skysčių mainų procesas ir 35-40min. buvo perdėtos koncentracijos procesas. Viso ultrafiltravimo proceso metu TMP buvo stabilizuotas tarp 0.{7}}.8 bar, padavimo greitis buvo pastovus, o vidutinis medžiagos srautas buvo 27 LMH.

 

2 l medžiagos koncentruotas skystis keičiasi į 60 ml, apie 33 kartus koncentruotas, gėlinimo greitis siekia 99%, regeneravimo greitis siekia 80%, po plovimo, skysčio padidėjimas 50 ml, bendras regeneravimas 88%, pramoninė gamyba pagal dujotiekio skaičiavimų negyvas tūris, kiek įmanoma padidinti viršutinio plovimo kartų skaičių, bendras viršutinis plovimas 3 kartus gali būti visiškai atkurtas.

 

Guidling Technology membraninės kasetės yra pagamintos iš medicininės klasės inertinių medžiagų, pasižyminčių stipriu atsparumu korozijai ir gali atlaikyti stiprų valymą šarmais; automatizuoto gamybos proceso naudojimas užtikrina gaminio tęstinumą ir kokybės patikimumą, didesnį mechaninį stiprumą, atsparumą priešslėgiui ir pakartotinio skalavimo efektyvumą; jis pasižymi itin hidrofiliškumu, kuris gali suteikti membranai didesnį srautą ir mažesnę baltymų adsorbciją; Taip pat turime optimizuotą srauto kanalo konstrukciją su mažesniu slėgio kritimu, kuris palengvina medžiagų perdavimą ir žymiai sutrumpina filtravimo laiką.

 

Mūsų membranų kasetės yra įvairių porų dydžių, nuo 1kd iki 1000kd. Tarp jų 1-10kd ultrafiltravimo membranos kasetės gali būti naudojamos gėlinimui ir pirogenų šalinimui; 30 kd ultrafiltracinės membranos kasetės gali būti naudojamos monokloninių antikūnų koncentracijai ir buferiui pakeisti; tuo pačiu metu mūsų tuščiavidurio pluošto gaminiai taip pat gali būti naudojami biologinių medžiagų koncentracijai ir pakeitimui, kurių poros yra 100 kd, 300 kd ir 500 kd, kurios daugiausia naudojamos daugeliui vakcinų produktų.

 

„Guidling Technology“ yra nacionalinė aukštųjų technologijų įmonė, daugiausia dėmesio skirianti biofarmacijai, ląstelių kultūrai, biomedicinos valymui ir koncentracijai, diagnostikai ir pramoniniams skysčiams. Sėkmingai sukūrėme išcentrinius filtrų įrenginius, ultrafiltravimo ir mikrofiltravimo kasetes, virusų filtrą, TFF sistemą, giluminį filtrą, tuščiavidurį pluoštą ir kt. Kurie visiškai atitinka biofarmacijos, ląstelių kultūros ir tt taikymo scenarijus. Mūsų membranos ir membraniniai filtrai yra plačiai naudojami koncentruojant, ekstrahuojant ir atskiriant išankstinį filtravimą, mikrofiltravimą, ultrafiltravimą ir nanofiltravimą. Mūsų daugybė produktų linijų, nuo mažo vienkartinio laboratorinio filtravimo iki gamybos filtravimo sistemų, sterilumo tyrimų, fermentacijos, ląstelių kultūros ir kt., atitinka bandymų ir gamybos poreikius. Guidling Technology laukia bendradarbiavimo su jumis!